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培養(yǎng)人胚腎細(xì)胞HEK-293需要注意這些事情

更新時(shí)間:2023-02-02 點(diǎn)擊量:930
  人胚腎細(xì)胞HEK-293是人類胚胎腎細(xì)胞,起初由荷蘭生物學(xué)家AlexVanderEb在1970年代初期分離和培養(yǎng)。VanderEb實(shí)驗(yàn)室的博士后FrankGraham用剪切的腺病毒5(Ad5)DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染。這是他們的第293次實(shí)驗(yàn),所以就命名該細(xì)胞系為HEK293,蓋細(xì)胞系的主要作用是通過細(xì)胞的基因改造實(shí)現(xiàn)重組蛋白合成。
  使用HEK293細(xì)胞有很多優(yōu)點(diǎn)。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護(hù)的細(xì)胞系,分裂迅速,大約每36小時(shí)可以增長(zhǎng)1倍。培養(yǎng)的細(xì)胞既能用于瞬時(shí)和穩(wěn)定表達(dá),也可懸浮培養(yǎng)或作為單層培養(yǎng),比較容易轉(zhuǎn)染,并且能夠產(chǎn)生大量的重組蛋白。
  
  培養(yǎng)注意事項(xiàng)
  1.HEK293在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),長(zhǎng)期培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活力下降,所以培養(yǎng)代數(shù)不宜過多,通常培養(yǎng)的代數(shù)維持在13代以下,如果選擇的細(xì)胞系超過20代,需要需要解凍新的細(xì)胞重新開始。
  2.實(shí)驗(yàn)操作過程中需要注意無菌操作,避免支原體感染,同時(shí)做好定時(shí)檢測(cè)。
  3.由于HEK293細(xì)胞系的衍生物較多,所以培養(yǎng)時(shí)需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)。
  目前,人胚腎細(xì)胞HEK-293主要用于癌癥研究、新藥開發(fā)、抗體蛋白生產(chǎn)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。